Mallory染色
實驗材料
Mallory試劑盒、95%乙醇、無水乙醇、二甲苯、中性樹脂
Mallory染色過程:
1. 組織準備
?固定?:將組織樣本固定于10%福爾馬林固定液中,以保存其形態(tài)和化學成分。
?脫水包埋?:將固定后的組織進行常規(guī)脫水處理,然后用石蠟包埋,以便切片。
2. 切片與脫蠟
?切片?:使用切片機將包埋好的組織切成4μm厚的石蠟切片。
?脫蠟?:將切片置于一系列不同濃度的乙醇中,使石蠟逐漸溶解并脫去,最終將切片水化至水相。
3. 氧化與漂白
?氧化?:將切片浸入酸化gaomengsuanjia溶液中氧化一定時間(通常為5分鐘),以增強組織的染色效果。
?水洗?:用蒸餾水或自來水輕輕沖洗切片,去除殘留的gaomengsuanjia溶液。
?漂白?:將切片浸入草酸溶液中漂白1~2分鐘,以去除多余的氧化產物,并準備進行染色。
4. 染色
?PTAH染色?:將切片浸入Mallory PTAH染色液(自然氧化法)中,加蓋浸染24~48小時。此步驟是染色的核心,磷鎢酸蘇木素將與組織中的蛋白質成分結合,形成鮮明的染色效果。
5. 分色與脫水
?分色?:用95%的乙醇迅速洗去切片上多余的染液,此步驟需迅速進行,以避免顏色過度脫失。
?脫水?:將切片依次置于更高濃度的乙醇中進行脫水處理,直至無水乙醇。
6. 透明與封固
?透明?:使用二甲苯等透明劑對切片進行透明處理,以去除切片中的乙醇并增加其透明度。
?封固?:最后,用中性樹膠將切片封固在載玻片上,以便長期保存和觀察。
染色結果:
Mallory染色是一種在生物化學和病理學實驗中常用的染色方法,特別用于結締組織的染色。它主要用于顯示膠原纖維和其他蛋白質成分,使得在顯微鏡下觀察時,這些結構能夠更清晰地呈現出來。
Mallory染色通常使用酸性品紅或天青B等酸性染料,并結合磷鎢酸或磷鉬酸等媒染劑。這些酸性染料能夠與組織中的蛋白質成分結合,而媒染劑則能增強染料的染色效果,使得染色更加鮮明和持久。
通過Mallory染色,病理學家可以更容易地觀察和分析結締組織中的膠原纖維和其他蛋白質成分,從而幫助診斷與這些結構相關的疾病。例如,在肝臟疾病的診斷中,Mallory染色可以幫助識別肝硬化時肝小葉結構的變化和膠原纖維的增生情況。
需要注意的是,Mallory染色是一種比較復雜的染色方法,需要經驗豐富的技術人員進行操作。同時,染色結果也可能受到多種因素的影響,如染液的濃度、染色時間、洗滌條件等。因此,在進行Mallory染色時,需要嚴格控制實驗條件,以確保染色結果的準確性和可靠性。